【摘要】  目的 探讨慢性粒细胞白血病(CML)不同病期染色体核型特点及其临床意义.方法 采用R显带技术对124例CML病人进行了常规染色体核型分析,并动态观察部分病人病程进展中染色体核型的变化.结果124例病人中,Ph染色体阳性(Ph+)占93.55%(116/124),Ph染色体阴性(Ph-)占6.45%(8/124).Ph+病人中,94.83%(110/116)为典型Ph染色体易位,即t(9;22)(q34;q11);5.17%(6/116)为变异型Ph染色体.11.21%(13/116)的Ph+病人出现额外染色体,其中慢性期、加速期和急变期额外染色体的检出率分别为7.48%(8/107)、33.33%(1/3)和66.67%(4/6),加速期和急变期额外染色体的检出率明显高于慢性期(χ2=19.285,P<0.01).额外染色体以+8、2Ph、-21和i(17q)多见.个别病例同时存在多个异常克隆,多见于CML急变期.结论 CML病人病程中继发额外染色体的异常改变与其病程进展密切相关,染色体核型分析对CML的诊断、治疗及预后判断具有重要意义.
　　【关键词】  白血病,髓样,慢性;费城染色体;额外染色体;核型分析
　　慢性粒细胞白血病(CML)是起源于多能干细胞的恶性骨髓增殖性疾病.90%以上CML病人白血病细胞中有恒定的、特征性的Ph染色体,其中绝大多数为典型易位即t(9;22)(q34;q11),少数病人可有变异易位(包括简单变异易位和复杂易位).随着病情进展,加速期和急变期病人可发生染色体核型演变,即出现Ph染色体以外的克隆性染色体异常[1].染色体核型分析对CML的诊断、治疗、病情监测及预后判断具有重要的价值[2].现将124例CML病人染色体核型分析结果报告如下.
　　1  资料与方法
　　1.1  一般资料
　　124例CML病人为青岛大学医学院附属各医院门诊及住院治疗的病人,其中男 76例,女48例;年龄13~74岁,平均42岁.慢性期 114例,加速期3例,急变期7例(3例初诊时为慢性期,分别于5个月~3年后急变).CML的诊断和分期参照文献标准[3].
　　1.2  染色体分析方法
　　采用骨髓细胞短期培养法(24 h)或外周血不加 PHA的短期培养法制备染色体标本,然后采用热处理姬姆萨R显带技术进行核型分析,113例病人分析10~20个分裂中期细胞,11例病人分析细胞数少于10个.核型异常参照人类细胞遗传学国际命名体制(ISCNI991)中的有关规定进行描述.124例CML病人共做 148例次染色体检查,其中大多数病例仅做 1次,部分病例作了2~3次检查.
　　2  结果
　　2.1  染色体的核型特点
　　本文124例病人中,Ph染色体阳性(Ph+)116例(占93.55%),Ph染色体阴性(Ph-)8例(占6.45%).其中慢性期病人中有107例Ph+(占86.29%),3例加速期病人均为Ph+(占2.42%),急变期病人中6例Ph+(占4.84%). Ph+病人中,94.83%(110/116)为典型 Ph染色体易位,即t(9;22)(q34;q11),5.17%(6/116)为变异型染色体易位,如t(13;22)(q33;q11)、t(11;22)(p15;q11)、t(9;22;18)(q34;q11;q21)和t(1;22;7)(p36;q11;q22)等.
　　2.2  染色体核型演变特点
　　116例Ph+病人中有13例(11.21%)出现额外染色体,其中8例为慢性期病人,占慢性期病人总数的7.48%(8/107);1例为加速期病人,占加速期病人总数的33.33%(1/3);急变期病人4例,占急变期病人总数的66.67%(4/6),加速期和急变期额外染色体的检出率明显高于慢性期(χ2=19.285,P<0.01),额外染色体以+8、2Ph、-21和i(17q)多见.3例病人同时存在2个异常克隆,1例病人同时存在3个异常克隆,这些病人均多见于急变期.
　　3  讨论
　　CML是一种造血干细胞的高度异质性疾病,Ph染色体是其最特异的染色体异常,由此而产生的bcr/abl基因重排是CML较为特征性的分子标志,也是客观准确地确定CML的主要依据[1].文献报道,大约93%的CML病人Ph染色体阳性,7%的病人Ph染色体阴性.我们所检测的124例病人中Ph染色体阳性病人占93.55%,阴性病人占6.45%,与文献报道一致[4].对于Ph-的CML可进一步分为Ph(-)bcrabl(+)和Ph(-)bcrabl(-),前者仍属于Ph+的CML,后者可能并非真正的CML,而是不典型的其他骨髓增殖性疾病[5].由此可见,染色体及融合基因的检测不仅有助于CML的诊断和鉴别诊断,而且可以对其进行细胞遗传学分型,细胞遗传学分型对CML的治疗具有重要的临床价值.
　　有资料显示,在Ph+的CML中,大约有94%病人有典型的Ph易位,而仅有约6%病人发生变异型Ph染色体易位,包括简单变异易位(22号与非9号之间的易位)和复杂变异易位(3条或更多条染色体易位).在变异易位的病例中除Y染色体外,所有其他染色体均可被累及[6,7].本研究结果与上述文献结果基本一致,大约94.83%的CML病人为典型 Ph染色体易位,5.17%为变异易位,如t(13;22)(q33;q11)、t(11;22)(p15;q11)、t(9;22;18)(q34;q11;q21)和t(1;22;7)(p36;q11;q22)等.简单易位的分子生物学研究结果显示,位于9号染色体长臂上的abl癌基因总是受累,都存在9q34和22q21的易位,表明简单变异易位实际上都存在着 9q34和 22q21的易位,也就是说所有的简单变异型 Ph染色体都可以看作是一定的检测手段检测不出来的复杂变异型 Ph染色体[8,9].由此可见,变异易位和复杂易位都有共同的分子病理学改变,因此二者在临床、血液学表现和预后特征等方面几乎没有区别.一般认为,在CML急变时70%的病人常出现额外染色体的改变,最多见的改变依次为+8, 2Ph和i(17q).CORTES等[9]报道,慢性期、加速期和急变期CML病人核型演变的发生率分别为7.5%、40.0%、80.0%.本文CML病人慢性期、加速期和急变期核型演变的发生率分别为10.28%、66.67%和83.33%,与文献基本相似.本文还显示存在2个或3个异常克隆者主要见于急变期,这说明染色体核型演变主要和CML病情进展相关.最常见的额外染色体异常依次为+8、2Ph、-21和i(17q),三者可单独或联合出现,以+8合并2Ph最多见.另外,我们的临床随访还显示,部分病人检出额外染色体异常时,临床上尚无急变征象,表明核型演变往往和急变同时或更早发生.因此,CML病程中监测染色体核型的改变对预测CML病情进展及预后判断有一定价值.
　　一般而言,Ph染色体存在于CML的整个病程中,常规化疗对其无明显影响.但近来研究显示,Ph染色体的消长与治疗有一定的相关性,部分病人经骨髓移植或某些化疗药物治疗后Ph+细胞的百分比有所下降,少数甚至完全转阴[10].因此,CML病程中进行染色体核型监测还有助于判断疗效.
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