电针不同经穴对小肠运动抑制模型肌电活动影响的比较
　　摘要: 目的观察分析小肠肌电的变化,比较针刺不同经穴对小肠运动抑制模型大鼠的小肠肌电( EMG) 活动的影响.方法雄性成年Wistar 大鼠随机分成空白对照组、模型对照组、电针治疗组3 组,电针治疗组再分为4 个穴位亚组.静脉注射阿托品致小肠运动功能障碍的模型,电针单侧足三里、梁丘、内关、大陵4 穴,运用BL - 420 电生理记录仪,记录小肠平滑肌电动作电位频率变化.结果各组造模前小肠平滑肌电活动无显著性差异( P > 0. 05) ; 空白组整个观察期均无明显变化;模型组造模前后比较,动作电位频率明显降低( P < 0. 01) ; 电针治疗组中足三里、梁丘、内关3亚组针刺前后的小肠平滑肌动作电位频率明显增高( P < 0. 05) ,大陵组针刺前后无显著变化( P > 0. 05) ; 各穴位亚组组内比较,足三里改善小肠抑制状态的作用最强,与梁丘、内关、大陵之间差异明显( P < 0. 05) .结论静脉注射阿托品可降低小肠肌电的动作电位频率,明显抑制小肠运动;针刺不同经穴对小肠运动功能障碍的改善效果存在差异.
　　关键词:小肠肌电活动;电针;足三里;梁丘;内关;大陵;动作电位
　　穴位是经络脏腑之气转输和聚集的部位,体表的不同穴位对不同内脏病变具有特异性的诊断功能和治疗作用[1-3],但穴位与脏腑相关的规律尚需更进一步的探讨[4].本实验以经络脏腑相关理论为指导,观察阿托品静脉注射后的小肠运动变化特点以及肌电变化,比较同经异穴和异经异穴对小肠运动影响的效应差异,以期探讨针刺不同经穴对肠抑制模型大鼠小肠运动的调节作用差异.
　　1 材料与方法
　　1. 1 动物及分组雄性Wistar 大鼠60 只( 由华中科技大学统计医学院实验动物中心提供) ,6月龄,体重( 275 ± 25) g.随机分成4 组: 空白对照组10 只; 模型对照组10 只; 电针治疗组40 只,再分为足三里、梁丘、内关和大陵4 亚组,每亚组10 只.
　　1. 2 主要药品和仪器硫酸阿托品注射液( 0. 5mg /mL,天津药业集团) ; BL - 420生物机能实验系统( 成都泰盟) ; G - 6805 - II 型针灸治疗仪( 上海华谊) ; 一次性无菌针灸针( 健卫仕牌) ; 银丝记录电极;铂金丝记录电极.
　　1. 3 模型制备胃肠运动抑制模型参照文献[5-7],并结合本实验特点加以改进.动物禁食12h,自由饮水.室温下大鼠称重后, 20% 乌拉坦( 7mL/kg) 腹腔注射麻醉.仰卧固定大鼠,于麻醉大鼠左大腿内侧切开分离各层暴露大隐静脉,经大隐静脉缓慢注射硫酸阿托品注射液( 1mg /kg) .
　　1. 4 电极安置方法常规方法打开腹腔,于幽门后3 - 5cm 之间确定运动较明显小肠段,以备记录小肠平滑肌电.在备用的小肠段用铂金丝电极插入其浆膜层,参考电极夹于皮下,电极输入端与BL - 420生物机能实验系统相连.设定输入信号为慢速电信号,增益200dB,时间常数5s,高频滤波100Hz,扫描速度5. 12s /div[5].
　　1. 5 电针治疗方法电针治疗组于造模后采用穴位刺激治疗.取穴参照华兴邦《大鼠穴位图谱》,取左侧的足三里、梁丘、内关及大陵[8].28号0. 5 寸针按图谱行穴位针刺,足三里( 小腿背外侧上1 /5 折点处,约于腓骨小头下0. 3cm,胫骨嵴后0. 1cm) 直刺0. 5cm; 梁丘( 大腿前,髌骨上,骨外侧肌与骨直肌腱间) 直刺0. 5cm; 内关( 前臂下1 /6 折点处,离腕关节0. 3cm 的尺桡骨骨缝间) 直刺0. 5cm; 大陵( 腕掌横纹的中点处) 直刺0. 3cm.参考电极置于穴位旁开0. 5cm 处.G - 6805 - Ⅱ型针灸治疗仪行穴位电刺激,设定参数疏密波8 - 80Hz,疏密波转换14 次/min,电压在1v- 3v 间调整,以保持动物局部轻微抖动为度,电流1mA,通电时间5min,留针10min.
　　1. 6 小肠平滑肌电的记录方法观察小肠平滑肌动作电位频率.各组小肠记录电极安置完成后持续观察约10min,待肠电稳定后开始以下记录: 空白对照组记录小肠平滑肌电70min; 模型对照组记录造模前小肠平滑肌电5min,造模后65min; 电针治疗组记录造模前小肠平滑肌电5min,于造模后5min 开始针刺,电针治疗完成后记录45min.
　　1. 7 数据采集与处理空白对照组取记录后30 - 40min; 模型对照组取造模后25- 35min; 电针治疗组取电针完成后5 - 15min.每时间段取样数为5,每个数据样本剪接基线平稳的波形,对所比较分析的波形取相同的下限[5].
　　实验所用数据为计量资料,以均值± 标准差( 珋x ± s) 表示.
　　各组组内数据均采用重复方差分析,组间采用单因素方差分析,以P < 0. 05 为显著性差异界限,采用SPSS 13. 0 统计软件,进行t 检验.
　　2 结果
　　2. 1 一般观察各组从实验记录开始后直视观察小肠情况70min.正常状态下小肠每分钟运动4 - 6 次,肠管呈明显阶段性收缩.空白对照组小肠未见明显变化; 模型对照组和电针治疗组静脉注射阿托品后约2 - 3min 小肠运动出现抑制现象,表现为肠蠕动节律减少,收缩程度下降.此抑制现象在造模后20 - 30min 段最为明显,且持续至60min 以后.电针治疗组取足三里、梁丘、内关穴位针刺后观察5 - 10min 小肠运动出现明显改善.
　　2. 2 电针对大鼠小肠平滑肌电的影响各组处理前观察值没有显著性差异( P > 0. 05) .空白组观察值整个观察期均无明显变化; 模型组造模前后比较动作电位频率明显降低( P < 0. 01) ; 电针治疗组针刺前后比较,足三里、梁丘、内关3 穴的频率增高( P < 0. 05) ,且足三里组较梁丘、内关增高明显( P < 0. 05) ,大陵组针刺前后没有显著差异( P >
　　0. 05) .各组小肠平滑肌动作电位频率比较,见图1、表1.
　　图1 小肠肌电截图( 截图时长50s)
　　3 讨论
　　胃肠道平滑肌肌电与胃肠道的运动密切相关,是反映胃肠道运动的灵敏指标.小肠在正常情况下有基本电节律( 慢波)和动作电位( 快波) 两种基本活动形式,慢波一般为缓慢的双向波,快波变化迅速呈单个或簇状,负载于慢波之上的单向或双向波.慢波是其基本的电节律,此时胃肠缺乏收缩活动,而动作电位( 快波或峰电) 只有在胃肠平滑肌收缩运动时才会发生[9-12].阿托品静脉注射对小肠肌电的影响表现为小肠电活动受抑制,快波发生频率明显降低,而快波振幅和慢波频率的变化均不明显[5 - 6、12].本实验采用静脉注射阿托品的造模方法,选取小肠平滑肌动作电位频率( 即快波频率) 变化作为评价穴位相对特异性作用观察指标.
　　穴位具有"反映病邪"的诊断作用和"痊愈疾病"的治疗作用.大量的实验结果证明穴位与脏器之间的特异性联系是普遍存在的,但这种特异性不是绝对的,从针灸临床实践和实验研究中可以看到,一个穴位不仅只对某一个脏器发挥作用,有时可以对多个脏器发挥作用或分治多种病证; 而多个不同的经络穴位在某些情况下又可以同时对某一脏器产生作用或同治一种病证,这反映了穴位主治功能相对特异性的特征.然而在经穴主治与内脏关系的研究中,多数是研究穴位刺激引起的效应,对穴位的相对特异性规律关注不足[10].本实验从"多穴一脏"的角度[11 - 13],以临床常用性并且在解剖学切段具有可比性为基本原则[14],选取手厥阴心包经的内关、大陵,足阳明胃经的足三里、梁丘( 足三里、梁丘位置接近,其神经节段基本相同,而内关和大陵也基本在同一平面) ,观察比较刺激以上各穴对小肠运动的效应差异.通过实验结果的分析可以看出: 电针治疗组不同经穴对小肠平滑肌肌电的作用即对抑制模型小肠运动的影响具有相对特异性,其中足三里组效果最好,梁丘、内关组作用次之,大陵组作用不明显.这一结果表明: ( 1) 针刺对于小肠运动表现为一种调理作用,这种作用对正常状态下的小肠不明显而对于病理状态下的小肠更为明显.以往的一些实验也证明针刺多表现为病态下的调节作用较强[13-15].( 2) 这种作用的产生可能是通过针刺穴位调整人体神经系统、内分泌系统的平衡,通过生理、生化途径,改善小肠平滑肌电生理状态,从而最终能调整小肠运动,达到治疗小肠动力障碍等一系列胃肠疾病.鉴于肠道神经支配及运动调节的特点,植物神经系统可能在调节小肠运动中发挥了重要作用,本实验中针刺效应出现较快也提示其通过神经途经发挥效应的可能性较大.( 3) 由于机体、系统、器官、组织和细胞在结构功能上联系和影响的复杂性,故而针刺同经异穴和异经异穴对于病理状态下小肠运动的影响存在差异.