【摘要】目的 对糖尿病肾病患者进行琼脂糖凝胶尿蛋白电泳测定,分析患者尿蛋白成分特点,探讨糖尿病肾病患者进行尿蛋白电泳的临床意义.方法 采用全自动琼脂糖凝胶电泳分析仪对20例正常对照组及60例糖尿病患者进行尿蛋白电泳分析.结果 60例糖尿病患者,24例尿蛋白定性阴性中有17例没有检出尿蛋白,1例肾小管性蛋白尿,6例为生理性蛋白尿.36例尿蛋白定性阳性患者生理性蛋白尿7例,4例肾小管性蛋白尿,15例肾小球性蛋白尿,10例混合性蛋白尿.结论 对糖尿病患者进行尿蛋白电泳测定,对糖尿病患者早期肾损伤诊断、判断肾损伤程度和部位有重要意义.
　　【关键词】糖尿病肾病  尿蛋白电泳
　　【Abstract】 Object Objective of diabetic nephropathy in patients with agarose gel electrophoresis of urinary protein determination, analysis of urinary protein composition in patients with characteristics of the patients with diabetic nephropathy urine protein electrophoresis of clinical significance. Methods  Automatic analyzer agarose gel electrophoresis of 20 cases of normal control group and 60 cases of diabetes in patients with urine protein electrophoresis.Results  The results of 60 cases of diabetic patients, 24 patients with negative qualitative urine protein in 17 cases not detected in urine protein and one cases of renal tubular proteinuria, proteinuria in 6 cases of rational living. Characte  rization of 36 cases of urinary protein in patients with positive physiological proteinuria in 7 cases, 4 cases of renal tubular proteinuria, glomerular proteinuria in 15 cases, 10 cases of mixed proteinuria. Conclusion  Diabetic patients with determination of urine protein electrophoresis of renal injury in diabetic patients with early diagnosis, to determine the extent and site of renal injury are important.
　　【Key words】diabetic nephropathy  urine protein electrophoresis
　　糖尿病(DM)近年来在全球其发病率呈上升趋势.糖尿病可引起微血管及大血管并发症进而累及全身脏器导致一系列病变.在糖尿病诸多的并发症中以糖尿病肾病(DN)最为常见,而蛋白尿是肾病最常见临床表现,尿蛋白的蛋白组分在一定程度上反映肾脏病变部位及程度[1],琼脂糖凝胶尿蛋白电泳是按分子大小予以分离,尿液不用浓缩,操作简便.本文对60例糖尿病患者尿液进行尿蛋白电泳分析,探讨糖尿病患者进行尿蛋白电泳的临床意义,现报告如下.
　　1 材料与方法
　　1.1 检测对象 60例2型糖尿病患者系我院内分泌科确诊的病人,符合1999年世界卫生组织(WHO)制定的糖尿病诊断标准[2].其中男38例,女22例,年龄21~80岁,病史1~20年,患者均无泌尿系统感染、急慢性肾炎及近期使用肾毒性药物史.对照组20例为门诊健康体检者,年龄20~60岁.
　　1.2 仪器和试剂 尿蛋白电泳用法国sebia公司生产的HY-DRASYS全自动电泳仪及配套尿蛋白电泳试剂;日立7600全自动生化分析仪,尿微量白蛋白(mALB)所用试剂为郎道试剂公司生产,桂林优利特干化学尿液分析仪及配套试剂;自备试剂9g/LNaCl.
　　1.3 方法
　　1.3.1 标本收集与处理 收集新鲜晨尿10ml离心取上清液,用干化学法测定尿蛋白,尿蛋白定性结果大于(++)尿液标本用9g/LNaCl稀释.
　　1.3.2 操作 严格按照仪器和各项目标准操作规程进行操作.
　　1.4 统计学处理 采用SPSS10.0forwindow统计软件进行统计分析,计量资料用x-±s表示,多组间的计量资料均数比方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义.
　　2 结果
　　2.1 60例患者尿蛋白定性(±~+++)36例(阳性组),蛋白定性(-)24例(阴性组),两组患者尿mALB.结果见表1.
　　注:与正常对照组比较,*P>0.05,#P<0.01.
　　2.2 糖尿病患者尿液经电泳后出现五种类型: (1)未检出:蛋白条带.(2)生理性蛋白尿:其图形特征为少量淡染的白蛋白带,其它大小分子区带均未出现.(3)小分子蛋(肾小管性蛋白尿):其图形特征为除白蛋白区带外,在凝阳极与白蛋白区带之间出现其它的蛋白区带.(4)大分子尿(肾小球性蛋白尿):其图形特征为除白蛋白区带外,在点和白蛋白之间出现的其它蛋白区带.(5)混合性蛋白尿:图形特征为上述蛋白区带都出现.结果见表2.
　　表2 两组患者与对照组尿蛋白电泳检测结果比较
　　3   讨论
　　DN是糖尿病最严重的微血管并发症之一,可引起微及大血管并发症进而累及全身脏器.据文献报道,Ⅰ型DM患者DN患病率33%~40%, 2型DM患者为20% ~25%[3,4].且DN发病隐匿进展缓慢,DM一旦发生肾损伤,出现持续性蛋白则病情不可逆转,往往进行性发展直至肾功能衰竭,故DN的早期诊断和治疗最为关键.尿mALB是肾损害最早临床征象,是糖尿病早期肾损伤指标之一.本文进行了尿mALB的检测,尿蛋白定性阴性组与对照组比较无统计学意义(P>0.05),尿蛋白定性阳性组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),尿蛋白阳性组>尿蛋白阴性组>对照组,提示尿mALB与DM病程有一定关系,检测尿mALB对DM肾损伤早期诊断有重要意义.蛋白尿的出现是肾脏疾病的临床表现之一,了解蛋白尿的组分变化可以间接判断肾受损程度和部位,琼脂糖凝胶尿蛋白电泳,是蛋白与十二烷基磺酸钠(SDS)连接,形成SDS-蛋白质复合物, SDS-蛋白质复合物在具有筛选功能的琼脂糖凝胶介质上电泳,蛋白按照它们分子量大小进行分离,通过区分不同位置的蛋白质条带,判断蛋白质分子的大小,进而可以判断:生理性蛋白尿(白蛋白区带,分子量=70KDa);肾小管性蛋白尿(分子量<70KDa);肾小管受损尿中小分子蛋白排除增加;肾小球性蛋白尿(分子量>70KDa),肾小球滤过膜受损,大分子蛋白漏出,分子量越大说明肾小球受损越重;混合性蛋白尿,白蛋白区带两侧同时出现大小分子蛋白带,肾小管和肾小球同时受损即出现混合性蛋白尿.从表2可以看出,对照组未检出蛋白区带,60例糖尿病患者24例蛋白阴性中有6例出现生理性蛋白尿,有1例出现肾小管性蛋白尿,提示此DM患者肾小管损伤已经开始;36例尿蛋白阳性组出现7例生理性蛋白尿,4例出现肾小管性蛋白尿,15例肾小球性蛋白尿,10例混合性蛋白尿,以上结果提示DM肾损伤以肾小球为主,对肾小管损伤较轻.从表2结果还发现,尿蛋白含量与肾损伤并不呈正比,有些尿蛋白定性(±)和(+)时,尿蛋白电泳显示肾损伤局限肾小管,已经累及肾小球,有些尿蛋白阳性(++)和++)时,尿蛋白电泳显示损伤仅局限于肾小球,出现大中蛋白,呈部分选择性蛋白尿.因此对DM患者进行尿蛋白测定,能早期敏感地检测尿蛋白组分变化,判断肾损伤程受损部位[5].肾活检是准确判断肾脏病变的方法,但属于创伤性诊术,不易被病人家属接受,且容易造成出血、感染等并发症.资料表明尿蛋白电泳结果与肾活检结果相符,尿mALB较敏感指标,但每次仅能检测单一指标,琼脂糖凝胶尿蛋泳则比较全面随时地无创伤地动态观察患者尿液中各组量及变化.综上所述,对DM患者进行琼脂糖尿蛋白电泳解DM患者肾损伤程度及部位有重要意义,建议有条件医展此项目,辅助临床早期诊断DN.
　　参 考 文 献
　　[1]丛玉隆,王丁.当代检验分析技术与临床[M].北京:中国技术出版社,2002:220~229.
　　[2]胡亚美,江载芳.实用儿科学[M].第7版.北京:人民卫生社,2003:2042.
　　[3]高原,葛青玮,蒋 巍.非浓缩尿琼脂糖蛋白电泳及其临用[J].上海医学检验杂志,2002,17(3):160~161.