【论文摘要】目的研究辣椒粉、大蒜、黄柏等10种常见中草药的体外抑菌性能及培养基对中草药抑菌效果的影响。方法采用药敏纸片扩散法确定各中草药对各病原菌抑菌性能及最小抑菌浓度（MIC）。结果辣椒粉对副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用，MIC分别为11.5%，11.5%；大蒜对副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有抑菌作用，MIC分别为6.25%，12.5%；黄柏等常见中草药对各病原菌也都有一定的抑菌效果。结论大蒜、辣椒提取物对特定病原菌有抑制作用，黄柏等常见中草药对各种病原菌均有较强抑菌效果。

【关键词】辣椒大蒜黄柏药敏纸片扩散法体外抑菌

辣椒是一种重要的日常调味品，有增进食欲和维持消化道正常菌群平衡的功能；辣椒碱对大肠杆菌、酵母等多种病原菌有抑制作用。大蒜中大蒜素和辣椒中辣椒碱有抑菌作用，这并不排除大蒜、辣椒中其它抑菌成分的存在，也不能完全代表它们的抑菌性能。本实验对辣椒水煎剂和大蒜乙醇制剂的抑菌性能加以研究，以期完善这两种保健调味品的抑菌性能研究。大蒜、黄柏、蒲公英等常见中草药常用于微生物性传染病的治疗。在此，我们探讨了辣椒、大蒜、黄柏等10种药用植物提取物对大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等常见病原菌的抗菌谱及最小抑菌浓度（MIC），希望能为它们的医药用途及生产应用提供科学依据。

1材料与仪器
　　1.1菌株和培养基大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为本实验室存留；大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌和枯草杆菌培养基为营养琼脂No.3，金黄色葡萄球菌培养基为葡萄球菌琼脂110和营养琼脂No.3。
　　1.2仪器垂直流超净工作台，DH3600A型电热恒温培养箱，手提式高压灭菌锅，2D-85型恒温振荡器，TU-1800型紫外可见分光光度仪，ZD-85型恒温摇床，AB204-S基础型电子分析天平等。
　　1.3中草药辣椒、大蒜等购自农贸市场，其它中草药购自中药店。

2方法
　　2.1大蒜素提取物的制备将去皮大蒜100g捣碎研细，乙醇浸提，浸提液挥发浓缩至200ml，获得50%的大蒜浸提物，并用乙醇作二倍系列稀释。
　　2.2辣椒、黄柏等煎剂类中草药提取物制备中草药粉碎过筛，进行干物质含量（DMC）测定；各中草药粉50g（以干物质量计）水煎制剂并浓缩至100ml，提取物浓度为50%，用水做二倍系列稀释。
　　2.3药敏纸片抑菌实验以6mm直径滤纸片在各中草药各稀释梯度浸提液中浸泡并晾干，置于涂有特定菌量的平板分区内，37℃过夜培养后记录各中草药提取物各稀释梯度对几种病原菌的抑菌情况，记录抑菌圈直径及最小抑菌浓度（MIC），各定性及定量抑菌实验均重复3次。
　　2.4培养基对中草药抑菌效果的影响金黄色葡萄球菌分别涂布于营养琼脂No.3和葡萄球菌琼脂110，以药敏纸片法观察各中草药制剂对两种培养基上金黄色葡萄球菌的抑菌效果。
　　2.5涂布菌含量的确定涂布菌原液制作10倍稀释梯度系列，以平板涂布法计算涂布菌液浓度。

3结果
　　3.1涂布菌含量测定以上述方法测定了各病原菌涂布菌液浓度。大肠杆菌2.8×108/ml；副伤寒沙门氏菌1.1×108/ml；金黄色葡萄球菌4.1×108个/ml；枯草杆菌1.3×106个/ml。
　　3.2大蒜提取物的抑菌结果从表1可以看出，大蒜乙醇提取物对副伤寒沙门氏菌和生长于葡萄球菌琼脂110上的金黄色葡萄球菌有抑制作用，MIC分别为6.25%和11.5%；在本研究浓度范围内对大肠杆菌和枯草杆菌无抑菌作用。表1大蒜提取物对病原菌的抑菌效果
　　3.3辣椒提取物的抑菌结果表2显示，辣椒浸提物对副伤寒沙门氏菌和生长于葡萄球菌琼脂110上的金黄色葡萄球菌有抑菌作用，MIC均为11.5%；对大肠杆菌和枯草杆菌未发现抑菌作用。表2辣椒提取物对病原菌的抑菌效果
　　3.4黄柏等中草药制剂抑菌结果黄柏、连翘等常见中草药的抗菌谱及最小抑菌浓度（MIC），其中黄芪、蒲公英、秦皮、乌梅、黄芩等中草药为对4种病原菌几乎都有抑菌作用，且抑菌作用较强，尤其是乌梅和秦皮对各种病原菌都有很强的抑菌作用。所选中草药中，只有青黛对4种病原菌均不抑制。
　　3.5培养基对中草药制剂抑制金黄色葡萄球菌效果的影响培养基对中草药抑菌效果有影响。从实验数据可以看出，各类中草药制剂对葡萄球菌琼脂110上的金黄色葡萄球菌抑菌效果明显好于生长于营养琼脂No.3上的抑菌效果，其中大蒜、辣椒、秦皮、远志制剂对前者抑菌作用明显，而对后者没有抑菌作用；大黄、乌梅、黄芩等制剂对前者的抑菌效果也显著好于后者。

4讨论
　　4.1大蒜和辣椒的抑菌成分。大蒜和辣椒均有特定的抑菌作用，但其抑菌成分尚未完全确定。郭丽等曾对辣椒的抑菌性能加以研究，认为水溶性辣椒碱为其抑菌成分，本实验中辣椒的水煎剂有良好的抑菌作用，进一步印证了前人的研究，但也不排除辣椒中其它辣椒红素等水溶性抑菌成分的存在。陈晓月等对大蒜素抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌效果加以研究，证明大蒜中醇溶性大蒜素参与大蒜抑菌作用，本研究中大蒜乙醇浸提剂对金黄色葡萄球菌和副伤寒沙门氏菌均有较强抑菌作用，但未见对大肠杆菌的抑制效果，可能与大蒜乙醇浸提物中大蒜素的含量较低有关。
　　4.2培养基对中草药抑菌作用的影响培养基为微生物的生长繁殖提供营养成分和合适的环境条件，微生物在不同的培养基上生长性能差别较大，在最适培养基上或天然培养基上生长繁殖旺盛。中草药等抗菌因子对微生物的抑制效果受到其生长环境的影响，培养基越适合，微生物生长越好，抑菌作用就越弱。在进行各种抑菌实验时，应尽可能确定培养基类型及涂布菌量，以便于不同研究结果的比较；培养基对抑菌效果的影响从另一方面也说明了体内和体外抑菌效果的差异，各类抗菌制剂通过体外实验获得的抗菌谱及剂量结果必须在临床上进一步验证确定，方可在体内有效抑制病原菌。
　　辣椒、大蒜在体外可抑制副伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌，黄柏、连翘等常见中草药对多种病原菌有较强抑制作用，培养基显著影响中草药体外抑菌效果。

参考文献
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