【论文摘要】目的 探讨微柱凝胶技术在交叉配血中的应用。方法用微柱凝胶技术和凝聚胺法对1293例临床输血标本进行交叉配血试验， 结果用统计学处理。结果 微柱凝胶法检出配血不合者41例， 凝聚胺法检出配血不合者30例， 漏检11例。结论 微柱凝胶技术在交叉配血中敏感、操作方便，更有效地保证了输血安全。

【关键词】凝胶类；血型鉴定；交叉配血

准确的血型鉴定及交叉配血是临床安全、有效输血的重要保证。近几年来， 微柱凝胶法（M icrot ubes Gel Test） 进入国内实验室并逐步成为交叉配血的新方法， 而在一些先进国家微柱凝胶技术己成为常规的红细胞血型血清学检测技术[ 1，2] 。我院2010年2月～2012年12月起采用微柱凝胶法操作系统，该方法操作简单，工作程序和结果判定易于标准化，大大减少了实验误差。

1 临床资料
　　1. 1 一般资料
　　在2010年2月～2012年12月来因各类疾病需要在我院输血治疗的患者1293例， 其中男816 例， 女477 例， 年龄7～82（ 平均48.7） 岁。
　　1. 2 试剂
　　手工聚凝胺试剂（ 伊利康生物技术有限公司）， 微柱凝胶卡， 离心机和孵育箱（ DiaMed 公司）， 抗人球蛋白试剂（ 上海血液中心） 。
　　1. 3 标本处理
　　对申请血型鉴定的送检血样用微柱凝胶血型卡做血型鉴定， 对凡预约次日用血的送检血样， 用微柱凝胶Co ombs 配血卡做交叉配血， 申请急诊（ 0. 5 h 内） 用血的送检血样， 用凝聚胺做交叉配血。对微柱凝胶卡或凝聚胺配血阳性及可疑的标本，交叉复查（ 微柱凝胶卡试验阳性用凝聚胺法复查，凝聚胶试验阳性用微柱凝胶卡复查） 。同时用间接抗球蛋白法鉴别， 并将阳性标本做抗体筛选及抗体鉴定。
　　1. 4 测定方法
　　微柱凝胶法： 交叉配血每个被检者占2 个微柱， 用定量加样器向主侧孔柱内加入50ul1%的献血者红细胞及25ul患者血浆， 向次侧孔柱内加入50ul1%的患者红细胞及25ul献血者血浆， 然后在37℃专用孵育器内孵育15min， 最后放入专用卡式离心机离心10 min 后判定结果。离心后红细胞沉积在微柱底层者为阴性结果， 滞留在凝胶上方或中间者为阳性结果。凝聚胺法： 按试剂盒说明书操作。
　　1. 5 统计学处理
　　实验数据采用Micro so ft Excel 软件进行卡方检验， 取P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结 果
　　采用MGT 在严格按照实验操作规程及排除了标本差错、技术失误和假阳性后， 共检出41例配血不合者，其中主侧不合 5 例， 次侧不合 30 例，主次侧均不合 6 例， 对此配血不合者标本重复试验， 并与凝聚胺法配血结果比较，凝聚胺法检出 30 例， 漏检 11 例。经卡方检验， 差异有统计学意义（ P< 0. 05） ， 见表1。
　　表1 两种方法检测结果比较
　　微柱凝胶法
　　凝聚胺法 合计
　　+ -
　　（ + ） 30 0 30
　　（ - ） 11 1282 1293
　　合计 41 1252 1293
　　注： P < 0.05。（ + ） 表示阳性（ - ） 表示阴性。

3 讨论
　　用于交叉配血的方法要求能检出所有的有临床意义抗体，才能达到安全输血的目的。目前：我国常用的能同时检出IgM和IgG 抗体的交叉配血方法主要有凝聚胺法和抗人球蛋白法。凝聚胺法和传统抗人球蛋白法各有优点， 但也有一些不足之处。MPT 法是利用阴离子溶液和聚凝胺减少红细胞表面的阳离子层及Zeta 电位，促进IgG 与红细胞的结合，缩短红细胞之间的距离而使红细胞凝集， 它受冷凝集、肝素等因素的影响，灵敏度低， 操作者对结果的判定需要有一定的经验。其存在非特异性因素，而且其观察是从有凝集到无凝集的过程，振摇的力度和解聚的时间需要严格掌握， 要求轻轻转动试管并同时观察结果， 观察时间不应超过1 min，弱凝集用力振摇或放置时间稍长便可能消失， 试验结果需在显微镜下观察，故对操作者的技术要求较高， 也增加了结果判断的不确定性[3] 。在必要时还需用抗人球蛋白法对结果进行确认。抗人球蛋白方法是目前测不规则抗体的经典方法， 准确性高但方法复杂，不适合应用于临床的配血要求。MGT 法其实是建立在抗人球蛋白基础之上的一种新方法，是生物化学凝胶过滤技术和免疫学抗原抗体反应相结合的产物， 通过调节凝胶的浓度来控制凝胶间隙的大小。使其间隙只能允许游离的红细胞通过，从而使游离红细胞与聚集红细胞分离。如果通过离心红细胞沉积在凝胶管底部，则表明红细胞未发生凝聚凝集，是阴性反应；若红细胞聚集在凝胶带上部， 则表明红细胞发生凝集，呈阳性反应[4] 。在微柱中进行，柱内预先装有凝胶、抗人球蛋白，红细胞与相应的抗体反应后离心， 凝集的红细胞被阻滞于柱上层，游离的红细胞沉于柱底， 结果明确可靠，用肉眼即可判断，是目前灵敏度最高的方法。41 例配血不合的患者采用凝聚胺法仅检出30 例，漏检11例，说明微柱凝胶法具有更高的灵敏和准确性。微柱凝胶试验要求标本抗凝，如制备的红细胞悬液浓度过高或混有小凝块时易出现假阳性，应当要注意排除鉴别。该实验孵育、离心时间较长，而且价格较贵，这是限制其推广应用的主要原因。

参考文献
　　[1] 张钦辉.临床输血学[M].上海：上海科学技术出版社，2000： 86-90.
　　[2] 武建.柱凝集技术的临应用及其实验研究现状[J].中国输血杂志， 2003， 16（5） ： 370.
　　[3] 舒象武. 应用微柱凝胶抗球蛋白技术进行交叉配血[J].中国现代医学杂志， 2003， 13（13） ： 116-118.